PLoS Genetics: первый раз получены ГМ-тихоходки при помощи CRISPR
Ученые Токийского универа первый раз эффективно получили наследственно измененных (ГМ) тихоходок на базе высокоустойчивого вида при помощи технологии CRISPR. Итоги исследования размещены в журнальчике PLoS Genetics.
Ученые использовали не так давно разработанный прием DIPA-CRISPR, который позволяет изменять гены беспозвоночных, в том числе насекомых, внедряя ДНК в зрелых самок, снутри которых развиваются яичка. Для исследования был избран вид партеногенетических тихоходок Ramazzottius varieornatus, все особи которого являются самками, чьи яйцеклетки развиваются в зародыши без осеменения. Также, данный вид способен выдерживать сильное обезвоживание благодаря выработке специфичного белочка, который обратимо превращает жидкое содержимое клеток в гель.
Нечем дышать.Как O2 оказывает влияние на враждебность раковых опухолейМолекулы грядущего.В РФ отыскали метод облегчить борьбу с раком. Как он работает?
В процессе опыта в полость тела родительских самок незадолго до их начальной откладки яиц был введен концентрированный раствор рибонуклеопротеинов Cas9 (РНП Cas9). РНП Cas9 внедряются в ооциты, что приводит к возникновению наследственно измененного потомства. Ученые также использовали одноцепочечные олигодезоксинуклеотиды (ssODN), чтоб эффективно получить тихоходок с нокаутированным геном RvY_01244.
Но DIPA-CRISPR и подобные ему способы были изначально разработаны на членистоногих, исследование показало его продуктивность на нечленистоногих организмах, подчеркивая широкую применимость этого способа к разным видам беспозвоночных, включая других тихоходок. Из слов создателей, данный прием должен облегчить разбор молекулярных устройств, лежащих в базе чрезвычайной толерантности к экстремальным условиям среды.
Система CRISPR сначала была выявлена у прокариотических организмов (микробов и архей), которые употребляют ее в качестве защиты против вирусов. Она представляет собой куски ДНК, подобные последовательностям ДНК у вирусов, которые кодируют недлинные цепочки РНК. Эта РНК показывает специальному белку-ферменту Cas, где в геноме вторгшегося вируса произвести разрез, чтоб нейтрализовать его. Ученые приспособили эту систему для разработки новых способов редактирования генома.
